在微生物实验中，LB培养基（Luria-Bertani Medium）是一种非常常见且广泛使用的基础培养基。它主要用于大肠杆菌（Escherichia coli）等原核生物的培养与扩增，因其成分简单、配制方便、营养丰富而受到科研人员和学生的青睐。
LB培养基的名称来源于其发明者——美国科学家马克斯·卢里亚（Max Delbrück）和法尔哈德·贝尔塔尼（F. C. Bertani）。这种培养基最初是为了研究噬菌体感染细菌的过程而设计的，但后来逐渐成为分子生物学、基因工程和微生物学实验室中的“标准配置”。
一、LB培养基的基本组成
LB培养基的主要成分包括：
- 胰蛋白胨（Tryptone）：提供氮源和氨基酸，是细菌生长的重要营养来源。
- 酵母提取物（Yeast Extract）：含有丰富的维生素、矿物质和有机氮化合物，有助于促进细菌的快速生长。
- 氯化钠（NaCl）：维持渗透压平衡，模拟细菌自然生长环境。
- 琼脂（Agar）：用于固体培养基的凝固，使细菌能够在表面形成菌落。
根据实验需求，LB培养基可以分为液体培养基（LB broth）和固体培养基（LB agar）两种形式。
二、LB培养基的配制方法
1. 液体LB培养基（LB Broth）
- 胰蛋白胨：10 g
- 酵母提取物：5 g
- 氯化钠：10 g
- 去离子水：1 L
将上述成分加入适量水中，搅拌至完全溶解后，用NaOH或HCl调节pH至7.0左右。然后进行高压灭菌（121℃，15 psi，15分钟），冷却后即可使用。
2. 固体LB培养基（LB Agar）
- 胰蛋白胨：10 g
- 酵母提取物：5 g
- 氯化钠：10 g
- 琼脂：15–20 g
- 去离子水：1 L
按照液体培养基的步骤操作，但在灭菌前需加入琼脂并充分搅拌，确保其完全溶解。灭菌后冷却至约50–60℃时倒入无菌培养皿中，待其凝固后即可用于菌落接种。
三、LB培养基的应用场景
LB培养基因其良好的适配性和稳定性，被广泛应用于以下领域：
- 细菌培养：如大肠杆菌、链球菌等常见菌株的增殖。
- 质粒转化实验：在分子克隆过程中，常用于筛选转化成功的菌株。
- 菌株保存：通过添加甘油制成的LB-Glycerol培养基可长期保存菌种。
- 抗生素筛选：在培养基中加入适当浓度的抗生素，可用于筛选抗性菌株。
四、注意事项
- 配制完成后应尽快使用，避免污染。
- 若需长期保存，建议分装后冷冻保存。
- 不同菌株对营养成分的需求可能略有差异，可根据实际情况调整配方。
结语
LB培养基虽然成分简单，但其在微生物实验中的作用不可小觑。掌握其正确配制方法，不仅能够提高实验效率，还能为后续的分子生物学研究打下坚实的基础。无论是初学者还是经验丰富的研究人员，了解并熟练使用LB培养基都是必不可少的技能之一。
